Molecula del ADN(Haz Clic Aquí Para Ver la Molecula del ADN)
La molécula de ADN tiene la estructura de una escalera formada por azúcares, fosfatos y cuatro
bases nucleotídicas llamadas adenina (A), timina (T), citosina (C) y guanina (G). El código
genético queda determinado por el orden de estas bases, y cada gen tiene una secuencia única de
pares de bases. Los científicos utilizan estas secuencias para localizar la posición de los
genes en los cromosomas y elaborar el mapa del genoma humano.
Biología molecular, se ocupa del estudio de la bases moleculares de la vida; es decir,
relaciona las estructuras de las biomoléculas con las funciones específicas que desempeñan en
la célula y en el organismo.
La estructura del ADN
La presentación del modelo estructural del ADN (ácido desoxirribonucleico) por Francis Harry
Compton Crick y Watson en 1953, fue el verdadero inicio de la biología molecular. La
importancia de este hecho se debe, por un lado a que es la molécula que transmite la
información hereditaria de generación en generación (véase Genética), y por otro a que la
propia estructura muestra cómo lo logra. El ADN es una molécula de doble hélice, compuesta
por dos hebras complementarias unidas entre sí por puentes entre las bases: adenina (A),
guanina (G), citosina (C) y timina (T). La A de una hebra se aparea siempre con la T de la
hebra complementaria, y del mismo modo, la G con la C. Durante la replicación o duplicación,
las dos hebras simples se separan y cada una de ellas forma una nueva hebra complementaria,
incorporando bases, la A se unirá a la T de la hebra molde, la G lo hará con la C y así
sucesivamente. De esta manera se obtiene otra molécula de ADN, idéntica a la original y por
tanto, el material genético se ha duplicado. Este material incluye toda la información
necesaria para el control de las funciones vitales de las células y del organismo. Durante la
división celular, las dos células hijas reciben igual dotación genética; de este mismo modo se
reparte el material hereditario a la descendencia, cuando se reproduce un organismo.
A partir del ADN se produce ARN y a partir del ARN se
producen proteínas
La copia precisa de la información genética contenida en el ADN nos lleva a la cuestión de cómo
esta información modela las actividades de la célula. El siguiente paso necesario para la
comprensión de este proceso fue el conocimiento de la transcripción, mecanismo mediante el cual,
el ADN forma la molécula de ARN correspondiente, en forma de una hebra simple. Tal como ocurre
en la replicación del ADN, la información genética se transcribe de forma fiel mediante la
adición de bases complementarias. Después, el ARN mensajero (ARNm) se traslada a los orgánulos
celulares llamados ribosomas, donde se lleva a cabo la traducción de proteínas. El código
genético gobierna la traducción, que se basa en la correspondencia que existe entre 3 bases o
triplete de la secuencia del ARN y un aminoácido específico de la secuencia proteica. El
triplete ACC provoca la adición de treonina en la secuencia proteica que se está formando,
CCC la de prolina y así sucesivamente. Por lo tanto la información contenida en la secuencia
lineal de bases del ADN codifica la síntesis de una secuencia lineal de aminoácidos de una
proteína. De tal manera, que un cambio en las bases del ADN conlleva un cambio en la proteína
correspondiente. Por ejemplo, un cambio de la base A por C en el triplete ACC produciría la
adición de prolina en lugar de treonina. Las proteínas son muy específicas, es decir tienen
funciones biológicas muy concretas, con lo cual un cambio que afecte a la función que realizan,
provocaría una alteración estructural o fisiológica en el organismo. Estas diferencias en la
información genética del ADN, son las responsables de las diferencias heredadas entre
individuos, tales como el color de ojos o las enfermedades genéticas como la hemofilia. A
partir del ADN se sintetiza ARN y a partir del ARN se sintetizan proteínas, éste es el llamado
"dogma central de la biología molecular".
Clonación génica e hibridación
Clonación génica e hibridación
Aunque el gran avance de la biología molecular fue durante la década de 1950, la verdadera
expansión de esta ciencia comenzó en la década de 1960 con el descubrimiento de la clonación
de genes. Esta técnica permitió aislar fragmentos libres de ADN puro a partir del genoma. Así,
fue posible secuenciar fragmentos de ADN, en los cuales estaban incluidos los genes. Todo esto
se completó con la puesta en marcha de la técnica de la hibridación, que consiste en el marcaje
con isótopos radioactivos de una molécula clónica de ADN, de la cual se conserva sólo una hebra
(ADN desnaturalizado o monocatenario). Después de este tratamiento, el fragmento sonda se emplea
para detectar secuencias complementarias en presencia de ADN o ARN. Ed Southern, puso en marcha
un procedimiento que se llama absorción de Southern y que se describe a continuación. Un ADN
genómico que contiene un gen X, se corta en fragmentos que se separan según su tamaño, y se
transfieren a un filtro. Al filtro con los fragmentos de ADN, se le aplica ARN o ADN marcado
radiactivamente, de secuencia complementaria a la del gen X (fragmento sonda), que delatará al
gen X al unirse a él. El método de absorción de Nothern es similar al anterior, el ADN que
contiene el gen X, se une al ARN sonda de distintos tejidos, permitiendo así detectar el gen
y cuantificarlo en los distintos tejidos. Estas técnicas han hecho posible recopilar una gran
cantidad de información sobre la estructura y la expresión génica.
Genes interrumpidos
El empleo del método de absorción de Southern para el estudio de la estructura génica condujo a
un importante hallazgo en el campo de la biología molecular. Este consiste en el descubrimiento
de la existencia, en los organismos eucariotas (plantas y animales), de regiones del ADN
llamadas exones (que se expresan), que contienen información para la codificación de proteínas
y están interrumpidas por otras secuencias del ADN, llamadas intrones (que no se expresan).
Estos intrones se transcriben junto a los exones a moléculas de ARN y son eliminados durante
el proceso de maduración del ARN. Este ocurre en el interior del núcleo celular y el resultado
es una molécula de ARNm sin interrupciones, es decir, sólo con los exones. Este ARNm maduro se
traslada al citoplasma celular y se une a los ribosomas, donde tiene lugar la traducción o
síntesis de proteínas.
El significado de los intrones no está claro, pero permiten diferentes combinaciones de los
exones presentes en el ARN inmaduro, que se procesará de distinta manera según los tipos de
células. Este sistema de maduración alternativa produce proteínas relacionadas pero diferentes
a partir del mismo gen.
Control de la transcripción
La técnica de absorción de Nothern se puede emplear para detectar la presencia de moléculas de
ARNm, procedentes de genes determinados, en extractos de tejido intacto. Estos estudios se
complementan con la hibridación in situ, que detecta el ARNm en células individuales, y de
esta forma se conoce su distribución en el tejido. La conclusión es que, en la mayoría de
los casos, el ARNm codificador de una proteína específica, está presente sólo en los tejidos
y en las células donde se expresa la proteína. De forma similar, los precursores inmaduros de
moléculas de ARN que contengan aún intrones, no son detectados en los tejidos si no están
presentes el ARNm o las proteínas.
En consecuencia, en la mayoría de los casos, la producción de proteínas diferentes en los
distintos tejidos está regulada por los genes que se han transcrito en cada tejido, lo cual
determina a su vez la eliminación de intrones y la traducción de proteínas. Esto se demuestra
midiendo la proporción de transcripción de un gen específico en diferentes tejidos, donde la
proteína puede estar presente o ausente.
La síntesis de proteínas distintas en los tejidos es vital para la comprensión de las diferencias
funcionales de los mismos y está controlada por la transcripción. Además, la transcripción
está regulada por factores de transcripción, los cuales se unen a secuencias específicas del
ADN (las regiones reguladoras) y activan este proceso. Puede ser que cada tejido tenga los
factores específicos que activan la transcripción de genes concretos, pero también es posible
que estén presentes, de forma inactiva, en todas las células. En ese caso se activarían por
señales específicas, como una modificación posterior a su síntesis, por ejemplo por adición de
residuos fosfato (fosforilación). Esto activará la transcripción de los genes que respondan a
la señal.
Secuenciación del ADN
Al igual que se estudia la expresión y la estructura de los genes se puede conocer, mediante
el sistema de secuenciación de ADN, su orden lineal de bases. El método más utilizado fue
ideado por Frederick Sanger en 1977 y en la actualidad se emplea en el Proyecto Genoma Humano,
que intenta secuenciar por completo el genoma humano. Gracias a esta técnica se puede conocer,
utilizando el código genético, la secuencia lineal de las cuatro bases, AGCT y por consiguiente,
la secuencia de aminoácidos de la proteína correspondiente. Es más sencillo secuenciar el ADN
que hacerlo en la proteína correspondiente, por lo tanto en la actualidad, la secuencia de
aminoácidos se determina de forma indirecta a partir del gen correspondiente. La utilidad de
este método se pone de manifiesto con el estudio de enfermedades genéticas. Se secuencia un
gen involucrado en una enfermedad, en individuos sanos y en individuos enfermos y al comparar ambas secuencias se descubre la alteración de la proteína que provoca la enfermedad. La variación de tan sólo una base puede provocar la sustitución de un aminoácido por otro, e incluso puede dañar un segmento del ADN, alterando así la porción correspondiente de proteína.
Estructura y función de las proteínas
La función biológica de una proteína está determinada por la secuencia de aminoácidos que la
componen y por la configuración espacial (estructura plegada en el espacio). En la década de
1960, John Kendrew, propuso el modelo de estructura espacial de la mioglobina, a partir de la
proteína purificada y mediante cristalografía de rayos X. A continuación, Max Peratz lo hizo
con una molécula más compleja, la hemoglobina. La hemoglobina está compuesta por cuatro
subunidades tipo mioglobina. Para conocer el orden de aminoácidos de una proteína se secuencia
ADN, sin embargo, el análisis estructural de la misma se realiza sintetizando proteína a
partir de un gen clónico (gen idéntico, que se inserta por ejemplo, en el genoma de una
bacteria). De este modo se obtiene proteína en gran cantidad. Además se pueden introducir
cambios específicos en el ADN genómico, mediante una mutación localizada, para que la
bacteria sintetice una proteína alterada. Los estudios de proteínas alteradas, han logrado
demostrar la relación de la secuencia de aminoácidos con la estructura y función de la proteína
resultante.
De la investigación a la aplicación terapéutica
La producción de grandes cantidades de proteína se realiza mediante la expresión del ADN
correspondiente en grandes cantidades. Este método se utiliza con fines terapéuticos, en
individuos que sufren alguna enfermedad causada por la ausencia de proteínas específicas. La
labor de purificación de tales proteínas se realiza a partir de animales o de cadáveres humanos.
Éste ha sido el planteamiento empleado para producir insulina en el tratamiento de la diabetes
y de hormona del crecimiento en el enanismo. En la actualidad, los intentos han estado
encaminados a prescindir de la fase de producción de proteínas y a tratar a los individuos
con enfermedades genéticas aportando los genes funcionales, de modo que la proteína necesaria
la sintetice el individuo afectado. La terapia génica aplicada desde la infancia ofrece a los
afectados la esperanza de un futuro mejor.
Perspectivas de futuro
La biología molecular ha avanzado mucho en los cuarenta años siguientes al descubrimiento de la
estructura del ADN. Estos progresos ofrecen la posibilidad real de conseguir un tratamiento
eficaz de las enfermedades humanas. Para ello es necesaria la comprensión de fenómenos tan
complejos como el desarrollo embrionario o el funcionamiento del organismo adulto. Aunque
quedan muchos retos por superar, la biología molecular ha alcanzado una gran importancia en
nuestros días, tanto es así, que hace 20 años no hubiera merecido un artículo en una
enciclopedia general.